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CHO-S倉鼠卵巢細(xì)胞價(jià)格
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產(chǎn)品名稱:
CHO-S倉鼠卵巢細(xì)胞價(jià)格
產(chǎn)品型號:
HL0006
產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
我們提供的CHO-S倉鼠卵巢細(xì)胞,源自于成年中國倉鼠卵巢深入活體組織切片的CHO細(xì)胞。建議懸浮培養(yǎng)。
CHO-S倉鼠卵巢細(xì)胞增殖能力取決于細(xì)胞取材、培養(yǎng)技術(shù)、培養(yǎng)條件等綜合因素。請按照正確的培養(yǎng)方法來解凍、傳代,以此保證細(xì)胞具備良好的增殖能力,方便您的后繼研究順利進(jìn)行。
  HL0006CHO-S倉鼠卵巢細(xì)胞價(jià)格的詳細(xì)資料:

本頁描述的產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,不用于臨床,非醫(yī)療器械,不做其他用途。

CHO-S倉鼠卵巢細(xì)胞價(jià)格

規(guī)格:1×106個(gè)/管
培養(yǎng)基:CHO無動(dòng)物源培養(yǎng)基
運(yùn)輸:干冰運(yùn)輸
保存:液氮保存

質(zhì)量控制: 

本細(xì)胞經(jīng)過了檢測,不含有細(xì)菌、真菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原體。 
培養(yǎng)條件:
37℃,8% CO2,PH值7.2~7.4,125rpm,無菌恒溫培養(yǎng)。

用途: 
本產(chǎn)品只提供給進(jìn)一步的科研使用,不可應(yīng)用于治療等其他方面。
細(xì)胞相關(guān)操作:

CHO-S倉鼠卵巢細(xì)胞價(jià)格
CHO-S細(xì)胞復(fù)蘇
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基(CHO細(xì)胞無血清培養(yǎng)基);
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,用血小球計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),按細(xì)胞密度6-7×105/ml接種到25ml無菌搖瓶中(帶空氣過濾通氣孔的搖瓶);
5.搖瓶置于37°C,8% CO2培養(yǎng)箱中的搖瓶架上,125rpm培養(yǎng)。
CHO-S細(xì)胞傳代
1.取細(xì)胞計(jì)數(shù)(詳見CHO-S細(xì)胞凍存),當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到1.0-3.0×106/ml時(shí)(不要超過3.0×106cells/ml),可傳代;
2.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基(CHO細(xì)胞無血清培養(yǎng)基);
3.在超凈臺(tái)中,加適量預(yù)熱好的培養(yǎng)基到無菌搖瓶中,以細(xì)胞終密度為6-7×105/ml接種細(xì)胞(也可1000rpm,5min離心后棄上清,用預(yù)熱好的培養(yǎng)基重懸并調(diào)整細(xì)胞密度為6-7×105/ml),轉(zhuǎn)移到無菌搖瓶中;
4. 搖瓶置于37°C,8% CO2的培養(yǎng)箱中的搖瓶架上,125rpm培養(yǎng)。
注:CHO-S細(xì)胞對氧的要求較高,因此,懸浮培養(yǎng)必須具有高表面積體積比,否則細(xì)胞的生長會(huì)受到抑制。培養(yǎng)基的體積不能超過搖瓶的五分之二;即100毫升的搖瓶不能超過40ml培養(yǎng)基,250ml搖瓶不能超過100ml培養(yǎng)基。
CHO-S細(xì)胞凍存
1.細(xì)胞計(jì)數(shù):
1)洗凈晾干血小板計(jì)數(shù)板和蓋玻片,將蓋玻片*覆蓋計(jì)數(shù)區(qū)
2)充分混勻細(xì)胞,取少量(0.1-0.5ml)細(xì)胞懸液與等體積的染色液臺(tái)盼藍(lán)混合,移液器吹吸混合均勻,用移液器取20ul混合液從蓋玻片兩端(與中間凹槽平行的兩端)分別打入細(xì)胞,以細(xì)胞懸液剛好浸濕蓋玻片為佳
3)顯微鏡下,數(shù)四個(gè)計(jì)數(shù)區(qū)的總細(xì)胞數(shù),無活性細(xì)胞染成藍(lán)色,活細(xì)胞不被染色
4)細(xì)胞密度=細(xì)胞總數(shù)/4×10000×2
這里10000是不變的,因?yàn)橛?jì)數(shù)的細(xì)胞是在體積為1mm×1mm×0.1mm即10-4cm3計(jì)數(shù)池內(nèi),1cm3=1ml,將四個(gè)計(jì)數(shù)區(qū)的細(xì)胞數(shù)除以4取平均數(shù),乘2是補(bǔ)償加等體積臺(tái)盼藍(lán)形成的稀釋。
5)細(xì)胞活性=活細(xì)胞數(shù)/細(xì)胞總數(shù)×100%
注:細(xì)胞密度高時(shí),可調(diào)整細(xì)胞懸液和臺(tái)盼藍(lán)的比例,計(jì)數(shù)時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)即可。
2.當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到傳代密度且細(xì)胞活性在90%以上時(shí),可以凍存細(xì)胞。
3.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基(CHO細(xì)胞無血清培養(yǎng)基)。
4.在超凈臺(tái)中將要凍存的細(xì)胞移入離心管,1000rpm離心5min。
5.棄上清,用90%培養(yǎng)液+10%DMSO的混合液重懸細(xì)胞,并調(diào)整細(xì)胞密度為5-10×106/ml。
6.將細(xì)胞懸液分裝到凍存管中(1-1.5ml/管)。
7.將裝有細(xì)胞的凍存管放入程序降溫凍存盒,-20°C放1-2h后,-80°C過YE,然后快速轉(zhuǎn)移到液氮中。

CHO-S細(xì)胞貼壁培養(yǎng)
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基(CHO細(xì)胞無血清培養(yǎng)基+10%FBS);
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞);
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,8% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6.4-6小時(shí)后,用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng);
7.每天觀察細(xì)胞的狀態(tài)和長勢;
8.當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到90%以上時(shí),給細(xì)胞傳代;
9.在超凈臺(tái)中,棄培養(yǎng)基,加入2-5mlPBS清洗細(xì)胞后,再加入1ml胰酶消化細(xì)胞;
10.顯微鏡下觀察到細(xì)胞變圓,有細(xì)胞開始脫離瓶壁時(shí),加入5ml培養(yǎng)基(CHO細(xì)胞無血清培養(yǎng)基+10%FBS)終止消化;
11.用移液器輕輕吹下瓶壁上剩余的細(xì)胞,并輕輕吹打?qū)⒓?xì)胞吹散;
12.將細(xì)胞移入離心管中,1000rpm離心5min;
13.棄上清,加入15-20ml的培養(yǎng)基(含血清)重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T75培養(yǎng)瓶中或按適當(dāng)比例傳到T25瓶中(確保細(xì)胞貼壁后融合度在25-50%之間),細(xì)胞密度在1×104 cells/cm2 (2.5×105 cells/T-25瓶),混勻細(xì)胞懸液,確保細(xì)胞均勻分布;
14.將培養(yǎng)瓶置于37°C

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sh-haling-12sh-haling-1296蒺藜對照標(biāo)準(zhǔn)品鑒別或含量測定3.0g
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