主要用途

  精子細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧（ROS）高質(zhì)熒光檢測試劑是一種旨在使用透膜熒光染色劑氯甲基二氯二氫熒光素二乙酯，在細(xì)胞氧化條件下，產(chǎn)生熒光，來定量檢測精子細(xì)胞內(nèi)活性氧族的生成和增加的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于動(dòng)物和人體精子細(xì)胞的活性氧族的檢測。可以被用于細(xì)胞凋亡、衰老、代謝和營養(yǎng)學(xué)，以及發(fā)育生物學(xué)（男性不育）等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡便，性能穩(wěn)定，熒光清晰。

技術(shù)背景

超氧自由基陰離子（superoxide radical；O2-）、過氧化氫（hydrogen peroxide；H2O2）、羥自由基或氫氧基（hydroxyl radical；OH-）、過氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氫過氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、過氧亞硝基陰離子（peroxynitrite anion；ONOO-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiquinone radical）、單線態(tài)氧氣（singlet oxygen）等細(xì)胞內(nèi)活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的產(chǎn)生和增多，甚而導(dǎo)致諸如男性不育、冠心病、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腫瘤、退行性病變等各種病理狀況。其中精子細(xì)胞（spermatozoa）對于活性氧較為敏感：低濃度活性氧可以調(diào)節(jié)正常精子功能、精子獲能、頂體反應(yīng)、精卵融合等；高濃度活性氧則影響精子細(xì)胞的質(zhì)量和功能，因?yàn)榫蛹?xì)胞質(zhì)膜含有大量不飽和脂肪酸，胞漿含有少量的祛除活性氧的相關(guān)酶蛋白，由此活性氧容易造成精子質(zhì)膜的流動(dòng)性和DNA完整性受到損害，精子運(yùn)動(dòng)能力降低，不能參與授精活動(dòng)，終導(dǎo)致特發(fā)性不育癥（idiopathic infertility）。氯甲基二氯二氫熒光素二乙酯（6-chloromethyl-2',7'-dichlorodihydro fluorescein diacetate, acetyl ester；CM－H2DCFDA）是取代二氯二氫熒光素二乙酯（2′,7′-dichlorodihydro fluorescin diacetate；DCFH-DA）的升級產(chǎn)品，一種*自由通過細(xì)胞膜，并在細(xì)胞內(nèi)長期滯留而不易外漏的染色劑。一旦被過氧化氫、過氧化基、過氧亞硝基陰離子等氧化，便產(chǎn)生熒光。據(jù)此測定精子細(xì)胞內(nèi)活性氧族的濃度。