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細胞半胱氨酸蛋白酶-3活性比色法定量檢測

點擊次數(shù):865 發(fā)布時間:2015/4/7
提 供 商: 上海哈靈生物科技有限公司 資料大?。?/td>
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主要用途


 細胞半胱氨酸蛋白酶-3活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過四肽化合物底物Ac-DEVD-pNA,受到半胱氨酸蛋白酶-3的水解,釋放黃色對硝基苯胺,產(chǎn)生吸光峰值的變化,即采用比色法來測定細胞裂解萃取樣品中酶活性而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞裂解萃取液樣品(動物、人體、昆蟲等)半胱氨酸蛋白酶-3CASPASE-3的活性檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。


技術(shù)背景


半胱氨酸蛋白酶(Cysteine-requiring Aspartate protease;CASPASE),或稱半胱天冬蛋白酶,是調(diào)節(jié)細胞凋亡的一類蛋白酶家屬。半胱氨酸蛋白酶-CASPASE-3;EC3.4.22.56)是半胱氨酸蛋白酶家屬中CED-3(Cell Death Gene Number 3;秀麗隱桿線蟲細胞死亡基因數(shù)3)分支的一種,又稱CPP32(Cysteine Proteinase Protein 32 kd;半胱氨酸蛋白酶蛋白32)、apopain(凋亡素)、Yama(印度傳說中的死亡之神)等。半胱氨酸蛋白酶-3前體為32kd,切離為17kd和11kd而激活細胞凋亡。其底物是多聚ADP-核糖多聚酶(poly(ADP-ribose)polymerase;PARP)、半胱氨酸蛋白酶激活DNA酶抑制劑(ICAD)等。半胱氨酸蛋白酶-3的活性檢測用來評價細胞或組織的凋亡狀況。基于人工合成的四肽化合物底物Ac-DEVD-pNA(acetyl-Asp-Glu-Val-Asp -p-Nithoaniline;乙酰天冬氨酰谷氨酰頡氨酰天冬氨酰對硝基苯胺)受到半胱氨酸蛋白酶-3的水解,釋放有色對硝基苯胺在分光光度儀405nm 波長)下,測定吸光峰值的變化,來定量測定半胱氨酸蛋白酶-3的活性。半胱氨酸蛋白酶-3反應(yīng)系統(tǒng)為: