主要用途
細(xì)菌脂肪酶（LIPASE）活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過底物三丁酸二巰基丙醇受到脂肪酶水解，釋放出巰基基團(tuán)，使用Ellman試劑，產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化，即采用比色法來測定樣品中酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心改良、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)菌細(xì)胞裂解液樣品脂肪酶的總活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。
技術(shù)背景
脂肪酶（lipase；EC3.1.1.3）是可溶性酶蛋白分子，催化不溶性脂質(zhì)分子的酯鍵（ester bond）的水解。許多細(xì)菌產(chǎn)生細(xì)胞外酶（exoenzyme），稱為水解酶（hydrolase），在水分子的參與下，催化底物的水解，成為細(xì)菌生理特征之一。其中脂肪酶（Lipase），裂解脂肪分子，例如甘油三酯（triglyceride；TAG）、脂肪、油等，產(chǎn)生1個分子甘油（glycerol）和3個分子脂肪酸分子（fatty acid），由此用于合成細(xì)菌脂質(zhì)和其它細(xì)胞成分，以及氧化產(chǎn)生能量。食品工業(yè)中，常用于食品發(fā)酵（rancidity），例如人造奶油（margarine）等。甚至用于廚房清潔劑和替代能源的生物催化作用。同時據(jù)此用以識別革藍(lán)氏陰性細(xì)菌，例如枯草芽孢桿菌（Bac. Subtilis）等。細(xì)菌脂肪酶在水分子的參與下，催化三丁酸二巰基丙醇（dimercaptopropanol tributyrate；DMPTB或BALB）的水解，產(chǎn)生二巰基丙醇（dimercaptopropanol；DMP），并釋放出巰基基團(tuán)（－SH），與Ellman試劑5，5-二硫基-雙（2-硝基苯甲酸）[5，5’-dithiobis-（2-nitrobenzoic acid）；DTNB]反應(yīng)后，產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸（5-thio-2-nitrobenzoic acid；TNB），通過其吸收峰值的變化（412nm波長），來定量分析脂肪酶的活性。脂肪酶反應(yīng)系統(tǒng)為：