主要用途

 組織乙酰輔酶A羧化酶（ACETYL-COA CARBOXYLASE）活性光度法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過底物乙酰輔酶A和碳酸氫鹽受到乙酰輔酶A羧化酶的催化反應(yīng)后，進(jìn)而由丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng)，測(cè)定產(chǎn)生ADP過程中，伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）的氧化反應(yīng)， 即采用光度法測(cè)定其氧化后峰值的變化，以分析組織裂解樣品中乙酰輔酶A羧化酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）、部分或*純化酶樣品中乙酰輔酶A羧化酶活性的定量檢測(cè)，以及抑制劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，高度敏感。

技術(shù)背景

乙酰輔酶A羧化酶（Acetyl CoA Carboxylase；ACC；EC6.4.1.2），又稱為乙酰輔酶A碳酸氫鹽連接酶（Acetyl CoA：bicarbonate ligase-ATP），是ATP依賴性含生物素酶，參與脂肪酸生物合成。哺乳動(dòng)物乙酰輔酶A羧化酶單體分子量為225－250Kd，含有許多磷酸化位點(diǎn)，以及1個(gè)生物素輔基位點(diǎn)、2個(gè)催化位點(diǎn)和1個(gè)異構(gòu)（allosteric）位點(diǎn)。乙酰輔酶A羧化酶催化生物素輔基（prosthetic group）的羧基化反應(yīng)，然后將生物素上的羧基轉(zhuǎn)移到輔酶A上，產(chǎn)生丙二酰輔酶A（malonyl CoA），成為長(zhǎng)鏈脂肪酸合成前的關(guān)鍵步驟。AMP活化蛋白激酶（AMP-Activated Kinase；AMPK）調(diào)節(jié)該酶的活性，而十四烷基氧糠酸（5-(tetradecyloxy)-2-furoic acid；TOFA）抑制該酶的活性。基于底物乙酰輔酶A（acetyl CoA）和碳酸氫鹽，在ATP的存在下，受到乙酰輔酶A羧化酶的催化，獲得產(chǎn)物丙二酰輔酶A和ADP，進(jìn)而通過丙酮酸激酶（pyruvate kinase；PK）和乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase；LDH）反應(yīng)系統(tǒng)中，還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide；NADH）轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（oxidized nicotinamide adenine dinucleotide；NAD），其吸光峰值的變化（340nm），來定量分析乙酰輔酶A羧化酶的活性。其反應(yīng)方式為：

Acetyl CoA Carboxylase

Acetyl Co-A  +  ATP  +  HCO3  →  Malonyl CoA  +  ADP  +  Pi

pyruvate kinase

Phosphoenolpyruvate  +  ADP       →      pyruvate  +  ATP

lactate dehydrogenase

pyruvate  +  NADH       →      lactate  +  NAD+