細胞采購的幾點注意事項

一、客戶收到細胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；細胞購買方式

二、如為貼壁細胞，請在顯微鏡下觀察細胞密度：

1. 未超過80%匯合度時，用75%酒精（建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水，噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴格無菌操作；然后打開蓋子，先用槍頭把培養(yǎng)基吸出10ml左右，放在離心管里，然后瓶口過火（嚴禁直接傾倒），這樣可以保證不污染，再用10ml的移液管，將剩余的培液全部吸出，放于離心管中，培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培養(yǎng)16hr(時間根據(jù)細胞生長情況調(diào)整）之后，傳代或者凍存。

2. 超過80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1) 棄去培養(yǎng)液，用3ml PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次；

2) 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于T25培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細胞隨即脫落下來；

3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中，按要求分瓶。

三、如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。

注意：換液時一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細胞不適應(yīng)而造成生長不好。

四、細胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？

（1）客戶造成細胞污染，不重發(fā)；

（2）客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

（3）非FDCC推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

（4）細胞狀態(tài)不好，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；

（5）細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；

（6）細胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；

（7）視具體情況而定。

五、細胞出現(xiàn)問題，可重發(fā)的情況有哪些？判定標準是什么？

（1）細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；

（2）凍存的細胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細胞未存活，重發(fā)；

（3）存活的細胞靜置24小時后，絕大多數(shù)細胞未存活，重發(fā)；

（4）凍存的細胞復(fù)蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；

（5）視具體情況而定。

六、售后服務(wù)政策

細胞污染問題，請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi)，給我們提出真實的實驗結(jié)果；細胞活性問題，請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果，我們調(diào)查核實后予免費調(diào)換，不收取任何費用。

需要客戶提供細胞培養(yǎng)說明、細胞操作處理方法、細胞質(zhì)量問題反饋表;如果搞不清原因的，或者客戶直接愿意支付購買價5.0折的費用直接復(fù)蘇。

如用戶收到細胞8-30天之內(nèi)，因處理不當造成細胞死亡或污染，我公司將以5.0折優(yōu)惠價重新提供一株原細胞

細胞活力狀態(tài)用臺盼藍染色法鑒定細胞活力。