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*培養(yǎng)基以及基礎培養(yǎng)基的用途
點擊次數:1425 更新時間:2013-11-18
 

        用以培養(yǎng)細胞的*培養(yǎng)基是由基礎培養(yǎng)基(如MEM)和添加劑(如血清或無血清培養(yǎng)用的某些確定的激素及生長因子)而組成。期間雖然培養(yǎng)基的配方一直在改進(這也包括抗生素和抗有絲分裂劑等等),但是基礎培養(yǎng)基的在培養(yǎng)基配方中依舊占據著為重要的地位。

 

        絕大多數的培養(yǎng)基都是建立在平衡鹽溶液(BSS)的基礎上的,再往其中添加氨基酸、維生素以及其它與血清中濃度相似的營養(yǎng)物質,這樣就形成了初步也是基礎的培養(yǎng)基。我們熟知的也是被廣泛應用的培養(yǎng)基“Eearle`s MEM ”的混合物,其中就包含了13種必須氨基酸和8種維生素。而次于MEM的Ham`s F12 也包含了許多非必須氨基酸,含有的維生素的范圍亦是很廣闊,另外也含有常規(guī)無機鹽和代謝添加劑(例如核苷酸)。

 

        MEM和F12 這兩種培養(yǎng)基各取1/2,就會形成神經生物學中通用的培養(yǎng)基“Dulbecco`s改良培養(yǎng)基——DMEM”,這種培養(yǎng)基現應用于快速生長的細胞,雖同MEM含有的營養(yǎng)成分相同,但其濃度高出2~4倍,令人驚訝。選擇某種培養(yǎng)基,應當經過仔細考慮,首先應細致的了解培養(yǎng)基成分表,其次我們應知道在大多數情形下培養(yǎng)基都是有不足的。

 

        例如,有些培養(yǎng)基在氨基酸中包括有谷氨酸,這種培養(yǎng)基雖廣泛用于神經生物學領域,但它對某些對谷氨酸敏感的可能有細胞外毒性損傷的神經元而言是具有危害的,所以并非是佳選擇,特別體現在如果神經元生長在缺乏膠質的環(huán)境中的時候。值得注意的F12中是含有硫酸亞鐵,據報道稱也是有神經毒效應,要注意使用。

 

        在所有這些培養(yǎng)基中,一般情況下谷氨酸是比其他氨基酸有更高的濃度的,這是由于它具有不穩(wěn)定性以及它在許多細胞培養(yǎng)中會常用作碳源。另外對于神經元的培養(yǎng)我們會常常在基礎培養(yǎng)基中會增加葡萄糖的含量到0.6%或者加入丙酮酸(注:若培養(yǎng)基中這兩種物質缺乏時)。對于MEM與F12要注意的是二者均是要用5%的CO2來平衡的,其中DMEM含更高濃度的NaCO3,所以要用10%的CO2來平衡,當然也可以在較低CO2濃度下使用,但效果差一些。不同基礎培養(yǎng)基的組成成分是建立在對不同細胞系生長的研究之上的,但通常在原代培養(yǎng)中使用也能有出人意料的的結果,令人滿意 。