純化線粒體凍存液產(chǎn)品說明書

主要用途

 純化線粒體凍存液是一種旨在幫助冷凍環(huán)境下儲存各種分離的純化線粒體（人體和動物等），確  保其膜完整性、維持新鮮狀態(tài)的超微結(jié)構(gòu)和生物學(xué)功能的保護性介質(zhì)。該溶液由大師級科學(xué)家精心研制、  成功實驗證明的。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌， 即到即用， 性能穩(wěn)定， 無病毒和支原體， 維護線粒體活力高達(dá) 95％以上。

技術(shù)背景

凍存保護（Cryopreservation）是長期儲藏和保存生物活體材料的基本手段。但是，在凍存過程中活體將受 到物理或化學(xué)性傷害諸如冰結(jié)晶體的形成、滲透壓的變化以及化學(xué)物毒性等，尤其是致命性的活體內(nèi)冰產(chǎn) 生， 所導(dǎo)致牽延和縮水等物理性損傷。作為凍存保護劑之一的丙三醇（Glycerol）被證實能夠阻止冰晶體的 發(fā)生。根據(jù)線粒體的生物學(xué)需求， 凍存溶液含有海藻糖（Trehalose），一種天然性二糖， 在植物中幫助共生 的物質(zhì)， 且防止脫水。在線粒體保存中， 維護膜完整性、維持新鮮狀態(tài)下的超微結(jié)構(gòu)和生物學(xué)功能達(dá)到 95 %以上，包括 ATP 合成，膜電位，鈣誘導(dǎo)性腫脹等。

產(chǎn)品內(nèi)容

 凍存液（Reagent A）

產(chǎn)品說明書

保存方式

保存  凍存液（Reagent A）在－20℃的冰箱里，有效保證 6 月

用戶自備

1.5 毫升離心管：用于線粒體收集后離心

4℃微型臺式離心機：用于沉淀線粒體

2 毫升凍存管：用于線粒體冷凍儲藏

實驗步驟

實驗開始前， 將試劑盒里的  凍存液（Reagent A）從－20℃的冰箱里取出， 置于室溫下溶化。然 后進行下列操作。

1 ． 將分離純化的 500 微升線粒體懸液（50 毫克/毫升）移入到 1.5 毫升離心管

2 ． 放進 4℃微型臺式離心機離心 5 分鐘，速度為 16000g（或 13000RPM，例如 EPPENDORF 5415） 3 ． 小心抽去上清液

4 ． 加入 xx 微升  凍存液（Reagent A）

5 ． 輕輕混勻顆粒群

6 ． 分批 50 微升移入到干冰預(yù)冷的凍存管里

7 ． 即刻放進液氮罐里快速冷凍

8 ． 24 小時后，放進－70℃的冰箱里保存

注意事項

1． 本產(chǎn)品為 50 毫升規(guī)格

2． 所有凍存操作和使用工具均須在嚴(yán)格無菌狀態(tài)下進行

3． 操作時，避免污染母液

4． 如果線粒體懸液容量低于 xx 微升，可以直接加入  凍存液（Reagent A） 

5． 凍存管線粒體凍存量可以達(dá)到每毫升 50 毫克

6． 凍存和解凍的基本原則是冷凍速度快速（放進液氮后快速冷凍， 再放進－70℃冰箱里保存），解凍速度 快速（用手捂熱解凍）

7． 本產(chǎn)品可以部分保護部分線粒體生物能量學(xué)功能

8． 本公司提供系列細(xì)胞凍存產(chǎn)品

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1 ． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定

2 ． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無病毒和支原體污染

3 ． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定維護線粒體活力高達(dá) 95％以上