60067.1 v.A

真菌格莫瑞六亞甲基四胺（Gomori's Methenamine Silver；）銀染試劑盒

產(chǎn)品說明書

主要用途

真菌格莫瑞六亞甲基四胺（Gomori's Methenamine Silver；）銀染試劑是一種旨在使用銀離子的醛基還原反應(yīng)技術(shù)，識別各種涂片或存檔中的石蠟包埋組織切片中棕黑色染色的真菌細(xì)胞的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良傳統(tǒng)格莫瑞（Gomori）方法、成功實(shí)驗(yàn)證明的。廣泛用于各種真菌菌株（例如aspergillosis和pneumocystis）的染色等。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，顯色清晰。

技術(shù)背景

真菌的細(xì)胞壁含有粘多糖（mucopolyssachride）成分，氧化后，釋放出醛基（aldehyde group），與銀離子反應(yīng)，使銀離子還原為黑色金屬銀，產(chǎn)生金黃色的背景下，棕黑色的真菌細(xì)胞。  

產(chǎn)品內(nèi)容

清理液（Reagent A）         200毫升

固著液（Reagent B）          10毫升

氧化液（Reagent C）          25毫升

強(qiáng)化液（Reagent D）            10毫升

染色液（Reagent E）               25毫升

置換液（Reagent F）          10毫升

穩(wěn)定液（Reagent G）          10毫升 

產(chǎn)品說明書    1份

保存方式

保存在4℃冰箱里；染色液（Reagent E）避免光照；氧化液（Reagent C）具有腐蝕性，注意操作安全；有效保證3月

用戶自備

恒溫培養(yǎng)箱或恒溫水槽：用于樣品反應(yīng)孵育

蓋玻片：用于切片封片

中性樹脂：用于切片封片

光學(xué)顯微鏡：用于切片染色后觀察分析

實(shí)驗(yàn)步驟

1．準(zhǔn)備好真菌涂片或4微米厚的石蠟切片脫蠟處理

2．小心加上200微升清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

3．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

4．小心加上200微升固著液（Reagent B）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

5．室溫下孵育15分鐘

6．小心移去切片上的固著液（Reagent B）

7．小心加上200微升清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

8．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

9．小心加上500微升氧化液（Reagent C）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

10．室溫下孵育60分鐘

11．小心移去切片上的氧化液（Reagent C）

12．小心加上200微升清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

13．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

14．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟12至13二次

15．小心加上500微升強(qiáng)化液（Reagent D）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

16．室溫下孵育1分鐘

17．小心移去切片上的強(qiáng)化液（Reagent D）

18．小心加上200微升清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

19．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

20．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟18至19二次

21．小心加入500微升染色液（Reagent E）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

22．放進(jìn)50℃恒溫培養(yǎng)箱孵育60分鐘，或直至出現(xiàn)棕色（注意：避免干枯）

23．小心移去染色液（Reagent E）

24．小心加上200微升清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

25．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

26．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟24至25二次

27．小心加上200微升置換液（Reagent F）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

28．室溫下孵育1分鐘，或直至出現(xiàn)灰色

29．小心移去切片上的置換液（Reagent F）

30．小心加上200微升清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

31．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

32．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟30至31二次

33．小心加入200微升穩(wěn)定液（Reagent G）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

34．室溫下孵育3分鐘 

35．小心移去穩(wěn)定液（Reagent G）

36．小心加入200微升清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面

37．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

38．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟36至37一次

39．（選擇步驟）復(fù)染處理 （建議使用淡綠（LIGHT GREEN）復(fù)染試劑盒——80091）

40．即刻放上蓋玻片或封片（中性樹脂）

41．在一般光學(xué)顯微鏡下觀察：

真菌――呈現(xiàn)棕黑色或黑色

粘蛋白——玫瑰紅

背景――呈現(xiàn)綠色（復(fù)染）

注意事項(xiàng)

1．本產(chǎn)品為50次操作

2．操作時，須戴手套

3．氧化液（Reagent D）具有腐蝕性，注意操作安全

4．氧化液（Reagent D）出現(xiàn)明顯棕色，須更換后使用

5．每次更換試劑溶液時，保持切片面基本晾干

6．試劑溶液在切片表面時，避免有氣泡存在，同時確保鋪滿切片表面

7．整個操作，在避光狀態(tài)下進(jìn)行

8．染色完成后，即刻進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察 

9．樣品染色后保存，避免光照

10．染色容易過度，注意觀察背景顏色，控制操作時間

11．本公司提供系列微生物染色試劑產(chǎn)品

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定

2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定顯色清晰