乙酰膽堿酯酶活性抑制劑篩選比色法檢測試劑盒 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
點擊次數(shù):971 更新時間:2017-01-17 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
HL70017.6 v.A
乙酰膽堿酯酶活性抑制劑篩選比色法檢測試劑盒產品說明書
主要用途
乙酰膽堿酯酶活性抑制劑篩選比色法檢測試劑是一種旨在通過乙酰膽堿酯酶反應系統(tǒng)中,在抑制劑存在與否的情況下,所釋放出巰基膽堿,與Ellman試劑反應后,產生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產物,出現(xiàn)吸光峰值的變化,即采用比色法來評價樣品酶活抑制能力的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種抑制劑篩選檢測。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。
技術背景
乙酰膽堿酯酶(Acetylcholinesterase;AchE;EC3.1.1.7),又稱為紅細胞膽堿酯酶(RBC cholinesterase),廣泛存在于真核生物,包括某些植物,尤其在腦組織、神經肌肉連接處(neuromuscular junction)、中樞神經系統(tǒng)的膽堿能突觸(cholinergic synapses)和紅細胞膜上高度表達,催化主要的神經傳導介質乙酰膽堿的水解反應,產生乙酸和膽堿,終止突觸傳導。其功能在于調節(jié)乙酰膽堿作用。神經毒氣,例如有機磷沙(Sarin),抑制乙酰膽堿酯酶活性,導致神經肌肉癱瘓,終發(fā)生窒息(asphyxiation)。血清乙酰膽堿酯酶濃度顯著降低與有機磷殺蟲劑中毒有關,因此血液檢測是環(huán)境污染的重要指標。基于人工合成底物碘化硫代乙酰膽堿(acetylthiocholine iodide),在抑制劑存在與否的情況下,通過乙酰膽堿酯酶的作用,水解產生乙酸和硫代膽堿(thiocholine),與Ellman試劑5,5-二硫基-雙(2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid);DTNB]反應后,產生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoic acid;TNB),通過其吸收峰值的變化(412nm波長),來定量分析乙酰膽堿酯酶抑制劑的效應。乙酰膽堿酯酶反應系統(tǒng)為:
產品內容
緩沖液(Reagent A) 毫升 反應液(Reagent B) 毫升 底物液(Reagent C) 毫升 陰性液(Reagent D) 毫升 產品說明書 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里;反應液(Reagent B)和底物液(Reagent C)避免光照;有效保證6月
用戶自備
乙酰膽堿酯酶:用于抑制劑篩選 1.5毫升離心管:用于樣品操作的容器 比色皿或酶標板:用于比色的容器 分光光度儀或酶標儀:用于比色分析
實驗步驟
注意事項
質量標準
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