主要用途:
　　動物細胞/組織線粒體粗提分離試劑是一種旨在從動物細胞或組織中分離出完整而純化的線粒體細胞器的
而經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適合于動物軟組織（肝或腦組織）和培
養(yǎng)細胞的線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高，可以被用于細胞凋亡、信號傳遞、能量代謝、蛋白組學和病理
生理學等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定，分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品
佳。

保存方式:
　　保存凈化液在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6 月

用戶自備：
HANK 平衡鹽緩沖溶液或PBS 緩沖溶液：用于清理細胞
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液：用于細胞脫離
*細胞培養(yǎng)液：用于細胞處理所需的培養(yǎng)基
15 毫升錐形離心管：用于線粒體初步制備物的存放
50 毫升錐形離心管：用于細胞或組織收集后離心或清洗
1.5 毫升離心管：用于保存線粒體
4℃臺式離心機：用于沉淀細胞
4℃超速離心機：用于分離細胞器成分
DOUNCE 勻漿器：用于裂解細胞

注意事項：

1． 本產(chǎn)品為10 次（1 克動物組織或5 X 107 細胞）或50 次（200 毫克動物組織或1 X 107 細胞）操作
2． 實際操作的動物組織重量或細胞量與試劑使用量按比例調(diào)整：例如200 毫克動物組織：試劑用量是標
準用量的五分之一
3． 所有操作均須嚴格在4℃或以下狀態(tài)進行
4． 操作時，須戴手套
5． 操作時，須無菌操作，避免污染母液，尤其是裂解液（Reagent B）和保存液（Reagent E）
6． 建議使用足夠的樣品量
7． 建議嚴格控制操作時間
8． 通常勻化次數(shù)為20 至40 下（或細胞顆粒群/組織塊狀消失為止）達到80％的細胞裂解為理想狀態(tài)，但
不同的組織或細胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3 微升勻漿物的細胞裂解程度：完整細
胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加勻化次數(shù)
9． 通常孵育5 分鐘（不宜超過5 分鐘）達到80％的細胞裂解為理想狀態(tài)，但不同的組織或細胞類型會存
在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3 微升裂解物的細胞裂解程度：完整細胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50
％可以增加孵育時間和渦旋震蕩次數(shù)
10．對于難以裂解的細胞，例如HeLa 細胞，采用物理勻漿法是優(yōu)先推薦的技術處理
11．通常1 克動物組織或5 X 107 細胞的線粒體含量為50 微克以上線粒體蛋白
12．如果需要計量線粒體，稀釋后數(shù)分鐘內(nèi)完成，否則線粒體將分解
13．本產(chǎn)品所獲得的線粒體純度和產(chǎn)量為理想。通過調(diào)整10000g離心速度到3000至8000g，可以提高粗提
的線粒體純化程度，但線粒體產(chǎn)量相應減少
14．如果需要獲得99％以上純度的線粒體，使用動物細胞/組織高質(zhì)純化線粒體分離試劑盒
15．線粒體正常活性測定方法是： CITRATE SYNTHASE 活性、氧化磷酸化、細胞色素吸收峰譜等
16．線粒體內(nèi)外膜完整測定方法是：CYTOCHROME C OXIDASE 活性和熒光JC 染色
17．本公司提供線粒體套餐：ROS、NAO、MitoTRACK、JGB、線粒體溶解等
18．本公司提供系列線粒體分析試劑產(chǎn)品